【佳学基因检测】高蛋氨酸血症基因检测

阻止遗传病遗传基因检测导读 

来自青岛的患儿做了高蛋氨酸血症基因检测。患者，女，汉族，入院治疗时为出生后12 天，系第1胎第1产。因新生儿疾病筛查异常提示高蛋氨酸血症入院。患儿于胎龄40⁺³周剖宫产出生，出生时体重4 580 g，身长52 cm，1分钟和5分钟Apgar评分均为9分，出生情况无异常。串者母26岁，孕期各项检查均未发现异常。患儿出生3 天后家属自愿接受新生儿疾病筛查以排除29种遗传代谢疾病，初步筛查结果异常。遂将患儿召回行进一步检查并进行基因检测。

入院体格检查：患儿吃奶好，无青紫、气促，无惊厥，无呕吐、腹胀，大小便正常；神志清，精神反应好；口唇红，面色红黄，皮肤微黄染，无皮疹、出血点；全身淋巴结无肿大；前囟平软，大小为1.5 cm；两侧瞳孔等大等圆，对光反射灵敏；颈软，胸廓两侧对称；呼吸45次/min，两肺呼吸音清；脐带干燥、未脱；腹软，肝脾无肿大，肠鸣音正常；四肢肌张力正常，生理反射正常。

按新生儿疾病筛查常规，患儿出生后72 h、充分哺乳6次后，足跟采集血斑进行新生儿遗传代谢病筛查。结果显示，促甲状腺激素（TSH）为4.46 U/mL，苯丙氨酸（Phe）为0.807 mg/dL，17α-羟孕酮（17-OHP）为3.38 nmol/L，均未见异常。串联质谱初次筛查发现蛋氨酸（Met）为101 µmol/L（参考值：8.0~55.0 µmol/L），Met/Phe比值为2.29（参考值：0.16~1）。于出生后12 d召回重新采集血样进行复查，结果显示Met 152 µmol/L，Met/Phe比值4.48，疑似“高蛋氨酸症”。血常规、肝功能未见明显异常。

基因检测分析：在监护人知情同意下采集患儿及患儿父母外周血2 mL，根据致病基因鉴定基因解码分析流程文献方法，对目的基因（常见的高蛋氨酸症致病基因MAT1A、GNMT、ADK、AHCY）进行扩增、文库扩建、NGS测序、数据分析。最后对这些变异位点进行功能注释并通过Sanger一代测序验证。经基因检测，发现该患儿MAT1A基因存在1个错义突变：c.791G > A（p.R264H）（图 1A），为杂合突变，经人类基因突变数据库（HGMD）查询，其ID为CM970910，呈显性遗传，可导致高甲硫氨酸血症。其他常见高高蛋氨酸血症致病基因GNMT、ADK、AHCY经测序检测未发现可疑致病性突变。对患儿及其父母进行Sanger测序验证发现，其父亲携带了与患儿相同的错义突变（图 1B），表明患儿突变来源于其父亲。对其父亲做了串联质谱的检查，其父串联检测正常，血浆Met浓度正常（47 µmol/L）。

治疗随访：按文献报道方案，根据患儿血浆Met浓度确定治疗方案（若血浆Met浓度超过300~350 µmol/L才给予特殊饮食及药物治疗），并常规随访，检测血浆Met浓度。本例患儿血浆Met浓度为152 µmol/L，因此未给予特殊饮食治疗。患儿1周岁体检时体格发育及智力发育正常，血浆Met浓度为77 µmol/L，较前几次检测稍有下降。

高蛋氨酸血症基因检测讨论

串联质谱技术可实现同时进行数十种代谢物分析，检测出包括氨基酸、有机酸、脂肪酸氧化代谢紊乱在内的多种遗传代谢性疾病。本例患儿通过串联质谱技术初筛最终确诊为高氨酸血症。原发性高蛋氨酸血症可由导致蛋氨酸腺苷转移酶Ⅰ/Ⅲ缺乏的相关基因（MAT1A、GNMT、AHCY等）突变引起，这些突变基因有的表现为隐性遗传，有的表现为显性遗传。本例患儿仅检测出1个致病位点（MAT1A基因R264H突变），该突变位点为显性突变位点。高蛋氨酸血症的发现一般都是通过新生儿串联质谱筛查提示血片中Met含量异常增高，经召回后通过致病基因鉴定基因解码确认诊断。

高蛋氨酸血症的报道甚少，关于其发病率也有较大差异。Chien等报道在1701591位中国台湾人群中确诊16例单纯型高蛋氨酸血症，发病率为1/106349，其中8例为MAT1A基因突变。Couce等报道西班牙人群中高蛋氨酸血症发病率约为1/23469，所报道的6例患者中5例为MAT1A基因缺陷。Nagao等报道日本人群发病率为1/107850。

高蛋氨酸血症与基因突变导致的遗传关系备受关注，目前已知有6种基因序列突变因素可导致蛋氨酸异常，包括甲硫氨酸腺苷转移酶（MATⅠ/Ⅲ）、胱硫醚合成酶（CBS）、甘氨酸N-甲基转移酶缺陷（GNMT）、S-腺苷高半胱氨酸水解酶、Citrin缺乏症和延胡索酰乙酰乙酸水解酶（FAH）。其中以MATⅠ与Ⅲ两种异构体缺陷最为多见，其编码基因为MAT1A，定位于人类10q23.1。高蛋氨酸血症基因检测报道的这例高蛋氨酸血症确诊患儿即MAT1A基因存在错义突变。迄今为止，国内外已报道该基因15种突变，大多为错义突变，普遍认为突变的方式不仅有地区、种族的差异，而且与疾病的临床表现、疾病程度、治疗方案都有一定关系。因此，明确病例基因突变类别极为必要。本例患儿的突变为R264H，体外研究发现第264位氨基酸残基参与亚单位聚合之间盐桥的形成，R264H突发的显性效应是通过影响R264/R264H二聚体形成从而降低酶的活性。Chien等首次报道的中国台湾人群中MAT1A基因以P357L突变最为多见，3例为R264H突变。随后更新串联质谱技术筛查新确诊的11例患儿中5例为R264H突变。Couce等报道的5例西班牙人群高蛋氨酸血症均为R264H突变。因此，R264H突变可能是较为常见的突变类型，但中国大陆尚未有高蛋氨酸血症R264H突变的报道。

单纯性高蛋氨酸血症是否应当常规进行饮食控制治疗存在争议。然而国内外专家普遍认为，对于MAT1A基因缺陷引起的高蛋氨酸血症一般临床预后良好，特别是R264H突变。本例确诊患儿未进行特殊治疗，定期复查血浆Met水平，目前患儿生长发育良好。