【佳学基因检测】儿科全身性自身炎症性疾病的基因检测诊断

儿科自身炎症性疾病基因检测导读

系统性自身炎症性疾病 (SAID) 是一种以先天免疫系统失调为特征的单基因和多基因遗传疾病。

儿科自身炎症性疾病基因检测的目的

炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组旨在描述 SAID 患者的临床特征。

儿科自身炎症性疾病基因检测研究方法

本研究是对 1998 年至 2020 年在炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组中心观察到的患有 SAID 的儿科人群的临床和遗传特征的回顾性图表回顾。

儿科自身炎症性疾病基因检测研究结果

共评估了 54 名患者：18 名患有周期性发热、口疮性口炎、咽炎和腺炎综合征；16 人患有白塞病；13 患有全身性幼年特发性关节炎；4 未分化反复发热综合征；1 与冷冻吡啶相关的周期性综合征；1 患有慢性非细菌性骨髓炎；1 人患有 Muckle-Wells 综合征。

儿科自身炎症性疾病基因检测研究结论：

炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组患者的临床特征分析与其他研究相似。炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的目标是提醒医学界及早识别和治疗 SAID，以提高儿科患者的生活质量。

关键词： 白塞病，儿童，临床症状，基因检测，全身性幼年特发性关节炎，治疗

介绍

自身炎症概念于 1999 年首次提出。炎症小体和系统性自身炎症性疾病 (SAID) 相关基因的发现使人们对其病理生理学有了更好的了解。

最常见的周期性发热综合征包括周期性发热、口疮性口炎、咽炎和腺炎综合征 (PFAPA)、家族性地中海热 (FMF)、肿瘤坏死因子 (TNF) 受体相关周期性综合征 (TRAPS)、甲羟戊酸激酶缺乏/高免疫球蛋白血症 D (IgD) ) 伴有周期性发热综合征、冷冻吡啶相关周期性综合征 (CAPS)（家族性感冒诱发的自身炎症综合征 [FCAS]、Muckle-Wells 综合征 [MWS] 和慢性婴儿神经、皮肤和关节综合征 [CINCA]）。

SAID 可能是单基因的、双基因的，在某些情况下，遗传模式更​​为复杂。后者包括白塞病 (BD)、全身性幼年特发性关节炎 (sJIA)、慢性非细菌性骨髓炎 (CNO)、结节病等。一些儿科患者出现不明原因的发热、浆膜炎、皮疹、关节痛、肌痛和其他常见于自身炎症性疾病的症状，可能不适合特定诊断，原因可能是非特异性临床表型或不确定的基因检测。这些病例目前被指定为全身性未分化反复发热综合征 (SURF)。

在这项研究中，炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组旨在描述 SAID 患者的临床、分析和遗传特征，只要有可用的治疗方法和预后。

材料和方法

本研究包括对 1998 年至 2020 年间在葡萄牙 Centro Materno Infantil do Norte 儿科风湿病科评估的儿童病历进行回顾性审查。这些​​患者包括患有 CINCA、MWS、PFAPA、 CNO、sJIA、BD 和 SURF。

所有单基因 SAID 患者均通过存在特征性临床特征、基因确认和对常规/生物治疗的临床反应进行诊断。PFAPA 患者根据 PFAPA 和儿科风湿病学国际试验组织 (PRINTO) 诊断标准 进行诊断，sJIA 患者根据国际风湿病学协会联盟标准 进行诊断，BD 患者根据国际风湿病学试验组织 (PRINTO) 诊断标准进行诊断。儿科 BD 的分类标准。

收集了有关临床和分析结果的数据，并考虑了其他系列儿科患者的报告。对单个病例进行独立分析。结果以百分比表示为中位数和四分位间距。

研究方案得到了 Centro Hospital Universitário do Porto 伦理委员会的批准（IRB 编号：28019）。

结果

从 1998 年到 2020 年，共有 54 名患者在炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的儿科风湿病科接受了临床标准或确诊为 SAID 的评估。

表格1显示观察到的 SAID 的一般特征。

表格1

观察到全身性自身炎症性疾病的一般特征

PFAPA，周期性发热伴口疮性口炎咽炎和腺炎；MWS，Muckle-Wells 综合征；sJIA，系统性幼年特发性关节炎；CINCA，慢性婴儿神经、皮肤和关节；CNO，慢性非细菌性骨髓炎；SURF，全身未分化反复发热综合征；IDD，疾病发作和诊断之间的间隔。

^*三名患者没有信息。

最常见的诊断是 PFAPA，其次是 BD 和 sJIA。SURF 的四个案例将在适当的部分中单独探讨，以及 MWS、CINCA 和 CNO。

周期性发热、口疮性口炎、咽炎和腺炎综合征

在炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组中心，共随访了 18 名诊断为 PFAPA 的患者，他们的主要临床特征描述于表 2.

表 2

PFAPA 患者的主要人口统计学特征和临床表现（n = 18）

除非另有说明，否则数值以百分比表示。

PFAPA、周期性发热、口疮性口炎、咽炎和腺炎综合征；IQR，四分位距；LN，淋巴结。

在炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的系列研究中，2 名患者（11.1%）有复发性扁桃体炎的阳性家族史。总体患者发病的中位年龄为 2.5 岁，发病与诊断之间的中位间隔为 1.5 年。所有患者均出现发热，大多数患者还伴有口疮性口炎、咽炎和颈部淋巴结肿大。在一般症状方面，也经常报告出现腹痛、关节痛和头痛。在炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的患者中，炎症标志物：C 反应蛋白 (CRP)、红细胞沉降率 (ESR) 和血清淀粉样蛋白 A (SAA) 分别在 77.8%、55.5% 和 61.1% 的患者中升高。在外部危机中，所有患者的 SAA、CRP 和 ESR 均正常化。关于治疗，所有患者都根据需要用皮质类固醇治疗，症状得到缓解。在一些患者中，还尝试了秋水仙碱 (5.5%)、孟鲁司特 (11.1%)、维生素 D (44.4%) 和扁桃体切除术 (11.1%) 的辅助治疗，但结果各不相同。8 名患者在诊断 5 年后观察到症状消退。

Cryopyrin 相关周期性综合征

Muckle-Wells 综合征

一名 19 个月大的女孩，自 15 个月大以来，反复出现发热、关节痛、肌痛、腕部和颈椎关节炎、荨麻疹病变和易怒一周。炎症标志物（CRP、ESR、SAA 和白细胞计数）升高。发作之间没有任何症状，炎症标志物正常。遗传研究在孩子和她的父亲（无症状）中发现了杂合的NLRP3基因突变 C.1909A>T (p. Met637Leu)。

泼尼松龙 (1 mg/kg/天) 的初始治疗控制了临床表现，但在泼尼松龙停药后她突然发作，因此在第一次给药后开始 IL-1 拮抗剂 (Anakinra) (1 mg/kg/天)，反应良好（不存在）危机、发烧消退和炎症标志物减少）。启动了按需 IL-1 拮抗剂 (Anakinra) 方法，自第一次给药后不再记录耀斑。

定期监测患者以排除疾病并发症，例如听力损失和淀粉样变性。

慢性婴儿神经、皮肤和关节综合征

一名 3 个月大的男孩出现持续性荨麻疹和全身淋巴结肿大，随后从第一个月大开始反复发作长时间发热（持续 1.5 个月）和易怒。补充评估还发现膝关节骨骺软骨结节、乳头水肿和轻度发育迟缓，听觉脑干反应正常。广泛的调查允许排除感染、恶性肿瘤和免疫系统疾病，实验室检查结果显示炎症标志物升高：ESR 55 mm/hr、CRP 81 mg/L 和 SAA 15.6 mg/dL（N < 0.64 mg/ DL)。他首先开始使用泼尼松龙和甲氨蝶呤治疗，并且在 13 个月大的时候进行基因研究，发现了一种新的NLRP3突变 C.1887A>T (p.Glu629Asp)。在 15 个月大时，他开始使用 IL-1 拮抗剂 (Anakinra)（1 mg/kg/天）进行治疗，随后临床和进行性分析得到改善，包括 SAA。在接下来的几年里，每天服用阿那白滞素出现了治疗依从性的问题；此外，在两次发作之间持续 SAA 升高（高于 5 mg/dL）的感染期间观察到疾病发作，引发了对长期淀粉样变性可能性的担忧。8 岁时，他改用抗 IL1 β (Canakinumab)，每 8 周 2 mg/kg，逐渐调整剂量至每 4 周 4 mg/kg，症状缓解和 SAA 正常化。

慢性非细菌性骨髓炎

女，8岁，右踝、左腕隐痛6周，夜间加重，入院前一周发热、局部肿胀、发热、发红。平片和磁共振成像显示左侧桡骨和右侧胫骨干骺端溶解性病变。血液检查显示 CRP (190 mg/L) 和 ESR (51 mm/hr) 升高。怀疑 CNO，但由于它构成排除诊断，因此开始使用克林霉素治疗。在最初的恶化后，开始用抗炎剂量的布洛芬治疗，有显着改善。骨活检组织学显示非特异性骨髓炎发现，血液和骨活检微生物培养均为阴性。抗生素治疗被取消，她完成了 6 个月的布洛芬治疗，影像学改善显着。

未分化反复发热综合征

炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组在此描述 4 个 SURF 案例。

SURF1

一名 17 岁男孩从 5 岁起反复发作（3-4 年）扁桃体炎、发热、口疮性病变、肌痛、腹痛和头痛，持续 3-5 天。当他 14 岁时，发作频率增加（大约每月 1 次）。

实验室研究显示炎症标志物升高，发作之间的 SAA 持续增加。第一天用泼尼松龙 0.5 mg/kg 治疗后退烧，但其他症状持续存在并持续 24-48 小时。

此外，他还出现了持续性虚弱，伴随着无法控制的肌痛和头痛。在秋水仙碱治疗失败后，开始使用 100 mg/天的抗 IL-1 (Anakinra)，疼痛和疲劳得到改善，SAA 恢复正常。基因检测显示SLC29A3基因 c.419C>T (p.Thr140Met) 存在杂合变异。

SURF2

一名 12 岁男性出现发热、腹痛、关节痛、肌痛、结节性红斑和斑丘疹疼痛性病变以及口疮性口炎和咽炎，持续 48 小时。自 10 岁起每 2 个月发作一次。实验室研究显示炎症标志物（ESR、CRP、SAA 和白细胞增多）升高和 IgD 水平升高（23.8 mg/dL），危机之间正常化。此外，尿甲羟戊酸正常。皮肤活检显示非特异性炎症浸润提示慢性皮炎。SAID 基因筛选小组的基因研究——下一代测序 (NGS) 为阴性。随访期间以口疮性口炎为突出症状，伴有发热和皮损疼痛。所以，进行 HLA 分型，显示 HLA-B51 和 HLA-B15 的阳性。患者按需使用秋水仙碱和泼尼松龙治疗，反应良好。

SURF3

一名 15 岁男孩，自 5 岁起出现反复和自限性发热（最高 41ºC）、腹痛、腹泻、关节痛、肌痛、咽炎，并在 2 次发作中出现荨麻疹和上唇血管性水肿。在危机期间，观察到炎症标志物（CRP、ESR、SAA 和白细胞增多）升高，危机之间恢复到正常范围。使用 SAID 基因筛查小组进行的基因研究 - NGS 无法识别致病突变，并且额外的 MEFV 和 TNRFS1A 测序未检测到任何重复/缺失。患者对秋水仙碱有良好的临床反应，在一年内完全消退。停止秋水仙碱治疗，无任何症状复发，患者过去 2 年无症状。

SURF4

一名 9 岁男孩出现 2 次持续发热、多汗症和非特异性肌肉骨骼不适，并在 5 岁和 6 岁时出现炎症标志物升高。没有出现其他症状。感染、自身免疫性疾病和恶性肿瘤等疾病被排除在外。否则，他在发热方面表现一般良好。

SAID 基因筛查小组的基因研究——NGS 为阴性。他开始使用 1-2 mg/kg/天的皮质类固醇进行治疗，直到炎症标志物正常化，后撤机直至暂停。

9 岁时（皮质类固醇停药后 2 年），他再次出现长时间发热并伴有肌痛和炎症标志物升高，以及肝炎的临床参数（天冬氨酸氨基转移酶 178 U/L，丙氨酸氨基转移酶 135 U/L，正常肌酸激酶、乳酸脱氢酶和醛缩酶）、高铁蛋白血症（1,035 ng/mL）、可溶性 CD25 升高（3,022 U/mL）和高甘油三酯血症（221 mg/dL）。进行了正电子发射断层扫描和脊髓造影，没有明显的发现。

开始使用 1-2 mg/kg/天的泼尼松龙治疗，临床和分析得到改善。然而，由于发热发作的复发和 SAA 升高的持续存在，停止使用皮质类固醇具有挑战性。因此，开始使用抗 IL-1 (Anakinra) 进行治疗时，临床和分析反应良好，这使得泼尼松龙暂停使用，迄今为止无症状。此外，对TNFRSF1A基因进行了测序，结果显示没有变化。

全身性幼年特发性关节炎

共有 13 名患者被诊断为 sJIA，其主要特征描述于表3.

表3

全身性幼年特发性关节炎患者的主要人口统计学特征和临床表现（n = 13）

除非另有说明，否则数值以百分比表示。

IQR，四分位距；ESR，红细胞沉降率；CRP，C反应蛋白；Hb，血红蛋白；WBC，白细胞计数；RF，类风湿因子；ANA，抗核抗体。

^*信息不可用。

炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的大多数患者是男性，大约一半报告了自身免疫性疾病的家族史。发病年龄≤2-16岁，10-16岁人群受影响最大。就诊时，所有患者均出现发热和关节痛，大多数患者出现关节炎、皮疹和肌痛。其他不太常见的表现包括淋巴结肿大、器官肿大和心包炎。

白塞病

共有 16 名患者被诊断为 BD，主要临床特征描述于表 4.

表 4

BD 患者的主要人口统计学特征和临床表现（n = 16）

在单独的窗口中打开

除非另有说明，否则数值以百分比表示。

IQR，四分位距；BD，白塞病。

大多数患者是女性，并且有 BD 阳性家族史。总体患者发病的中位年龄为 6.07 岁，发病与诊断之间的中位间隔为 2 年。

所有患者均出现口腔口疮，其中一些患者还报告生殖器溃疡和皮肤受累。四分之一的患者报告了眼部受累。考虑到 HLA 易感性，4 名患者 (25%) 的 HLA-B51/B5 结果呈阳性。所有患者均接受秋水仙碱作为一线治疗。

在眼部受累的患者中，2 名患者（12.5%）使用了硫唑嘌呤，1 名患者（6.2%）使用了抗 TNF-α（英夫利昔单抗），结果良好。5 例 (31.3%) 使用皮质类固醇，其适应症包括全葡萄膜炎和严重的口腔或生殖器受累。在炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的病例系列中，没有患者出现与 BD 相关的功能障碍。

讨论

炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组在此介绍和讨论临床特征、基因研究和对常规/生物治疗的反应。

一些方面值得强调，即炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组研究中 PFAPA 的低患病率，这可能是由于在其他儿科会诊中诊断不足或随访导致的低转诊率。此外，大多数病例是指过去 5 年确诊的患者，这可能反映了对这些疾病的日益认识。PFAPA 的诊断标准由 Marshall 于 1987 年首次提出，最近 Eurofever Registry 和 PINTO 推出了新的分类标准。由于缺乏特定的确认实验室或基因检测，其表现可能与单基因周期性发热非常相似，因此一开始诊断通常是推定的。可以应用 Gaslini 评分 选择表现为 PFAPA 但携带单基因周期性发热突变的高风险患者，该评分是在考虑存在任何增加遗传基础可能性的非典型临床表现的情况下计算得出的[15]。。

CAPS 被认为是严重程度不断增加的罕见综合征的连续体，包括 FCAS、MWS 和 CINCA。其表现可能包括全身、皮肤、肌肉骨骼和中枢神经系统炎症。遗传基础在于 NLRP3 中的功能获得性突变，该突变导致冷热蛋白炎性体的激活。

MWS 的特点是反复出现全身症状、眼部症状和疼痛性荨麻疹，这些症状通常始于儿童时期 。MWS 的显着症状是存在感音神经性耳聋，60% 的病例会出现这种情况。目前的知识支持大多数 CAPS 患者在 NLRP3 中具有杂合突变。考虑到炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组患者的父亲，由于他没有任何症状，因此有人质疑这是否可能是一种具有不完全外显率且意义不确定的突变，从而导致不同的表现。

CINCA 是一种罕见的自身炎症性疾病，通常以皮疹、关节病和中枢神经系统受累三联征为特征。它代表了最严重的 CAPS 表型。NLRP3 中的常染色体显性功能获得性突变允许在 65%–70% 的病例中进行诊断。

考虑到通常与该疾病相关的严重程度，炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组患者取得的临床和分析结果令人印象深刻。早期诊断无疑是决定性的，并且牵连的突变可能与更好的预后有关。

CNO 是一种影响骨骼的自身炎症性疾病。它包括早期发病的罕见遗传性单基因疾病，如 Majeed 综合征、白细胞介素-1 受体拮抗剂缺乏、化脓性关节炎、坏疽性脓皮病和痤疮综合征，但也包括更常见的“散发性”疾病，平均发病年龄为 9 岁年。儿童通常表现为骨痛，伴有局部肿胀和发热。锁骨、下颌骨和椎体受累特别明显。使用非甾体抗炎药治疗可使 60% 的病例在第一年得到临床缓解。其他治疗选择包括皮​​质类固醇、TNF-α抑制剂和双膦酸盐。考虑到炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的案例，炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组强调早期识别该实体的重要性，特别是在存在多灶性隐匿性骨痛的情况下，以避免不必要的长期抗生素治疗和并发症，如骨畸形、骨折或生长障碍。

炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组报告了 4 例患者，其临床表现、对 SAID 常规治疗的反应和缺乏基因诊断使炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组将其归类为 SURF。

关于患者SURF1，SLC29A3基因的突变可导致 H 综合征，并且已经描述了多种突变。除了色素沉着过度和多毛症外，最常见的特征包括手指和脚趾的屈曲挛缩、感觉神经性听力损失、身材矮小和肝脾肿大，然后是胰岛素依赖性糖尿病、淋巴结病和小细胞性贫血。一些报告还提到存在反复发烧，有时伴有关节炎症。在表型上，炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组的患者既没有皮肤也没有内分泌表现，这通常与 H 综合征相关，这种临床不一致部分可以通过发现的杂合子变异来解释，这可能与不太严重的表型相关。

考虑到患者SURF2，尽管临床表现主要提示甲羟戊酸激酶缺陷，尽管表现年龄不典型，但基因检测并未证实这种可能性。临床进化引发了 BD 的可能性，进一步得到了对秋水仙碱的良好反应的支持。然而，尚未满足BD诊断的临床标准。

在患者SURF3中，尽管一些特征提示 FMF，但荨麻疹的存在和MEFV突变的缺失与它相反。

关于患者 SURF 4，耀斑的反复和延长性质与 TRAPS 一致。然而基因检测，NGS和TNFRSF1A测序均为阴性。

对 SURF 患者的识别意味着需要经常重新审视诊断，因为某些病例将不可避免地进展并演变成更明确的临床实体。

sJIA 由特定标准定义。sJIA 的发病机制与先天免疫系统的促炎细胞因子（尤其是 IL-1b 和 IL-6）有关。与 sJIA 相关的并发症可能源于其演变或治疗本身。3 名患者（23.1%）出现巨噬细胞活化综合征；其他孤立病例表现为股骨头缺血性坏死、肺动脉高压和关节损伤。使用皮质类固醇（76.9%）和非甾体类抗炎药（23.1%）辅以甲氨蝶呤（30.8%），主要用于关节炎患者，并作为皮质类固醇节约剂。疾病控制不佳和侵蚀性多关节病程的风险导致 4 名患者（30.8%）使用抗 IL6（托珠单抗）。其中一名患者表现出较差的反应和疾病进展，伴有巨噬细胞活化综合征的风险，导致转换为抗 IL1 (Anakinra)。

BD 是一种全身性炎症性血管炎，其特征是自限性、不可预测和反复发作，涉及口腔和生殖器粘膜、皮肤、眼睛和关节。

儿童中的实际患病率尚不清楚，尽管被认为很低。发病机制复杂，但与 HLA-B5 相关的遗传成分很强，家族病例的频率在 10%–50% 之间变化。

通过提供炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组中心的数据，炎症性疾病的基因检测如何做到准确和有用研究组希望这份报告将有助于扩大对这些疾病的认识和认识，这些疾病仍然未被充分认识和诊断。

临床炎症的特征因潜在的遗传缺陷而异，但临床特征存在广泛重叠。分子分析是一种很好的工具并且易于使用，但是由于相同的遗传缺陷可能呈现不同的临床表现，因此无法在相当大比例的病例中提供诊断确认。最后，SAID 的治疗是一个永久性的挑战。