【佳学基因检测】免疫组织化学 (IHC)、显色原位杂交 (CISH) 和荧光原位杂交 (FISH) 技术的比较

佳学基因检测导读：

一个图表说明免疫组织化学 (IHC)、显色原位杂交 (CISH) 和荧光原位杂交 (FISH) 技术的比较在实体瘤肿瘤基因检测中原应用。优势与劣势的比较分析

	免疫组化	CISH	FISH
该方法的概念
	使用抗原特异性抗体评估蛋白质表达	酶促反应中显色效应的评估	使用荧光探针评估染色体畸变
优点
准备	- 简单的手动准备 - 可以实现自动化制备（例如，Ventana BenchMark – 美国）	- 简单的手动准备 - 可以实现自动化制备（Ventana BenchMark — 美国） - 染色的永久结果	- 简单的手动准备 - 由于快速杂交缓冲液，制备时间短 - 可以实现自动化准备（例如，Ventana Medical System，图森，美国）
分析	- 低价分析设备（光学显微镜） - 可以进行自动分析，例如 ACIS、ChromaVision Medical Systems（加利福尼亚州圣胡安卡皮斯特拉诺）或 Applied Spectral Imaging（以色列） - 简单的结果评估系统 (0, 1+, 2+, 3+)	- 低价分析设备（光学显微镜） - 可以进行自动分析（例如，应用光谱成像，以色列） - 可以同时评估拷贝数改变和细胞形态 - 结果的定量解释 - 可以使用内部对照	- 可能的自动评分（例如，应用光谱成像，以色列） - 结果的定量解释 - 确定探针的截止值
其他	- 低价	- 低价	- 允许区分HER2扩增与多体性 17（伪扩增） - 允许同时检测重排和删除（ALK，ROS1） - 允许检测许多可能的基因伴侣的重排（ALK，EWSR1） - 同一张载玻片上存在对照细胞（非肿瘤细胞）（制备的内部对照） - 独立观察员之间结果一致性的分析
缺点
准备	- 所用抗体、固定方法引起的灵敏度和特异性差异	- 固定和消化等技术错误会影响最终结果	- 使用标准化学品执行时非常耗时 - 荧光随时间逐渐减弱
分析	- 结果的半定量解释（主观评估） - 由于基于主观判断对结果的定性解释，结果之间可能存在差异（例如，分数 2+） - 使用 FISH 重新评估HER2 (2+) 结果的必要性 - 由于多体性 17（乳腺癌）导致 3+ 过度表达的假阳性结果 - 使用 FISH重新评估ALK阳性结果的必要性（有时也是阴性结果）	- 无扩增比例结果 - 需要进行额外染色以排除多体性，例如 17 号染色体 - 融合信号解释可能出现的问题	- 专用设备（带一组滤光片的荧光显微镜） - 对细胞特征（大小和形状）的有限评估 - 在低水平扩增情况下，独立观察者之间可能存在差异，模棱两可的情况（HER2） - 独立观察者之间在探针部件之间的边界距离上可能存在差异
其他	-	-	- 与其他两种方法相比成本较高
	使用该方法的实体瘤实例
	- 乳腺癌 - 胃癌 - 肺癌 - 神经胶质瘤 - 卵巢癌 - 软组织肉瘤：EWS、SS、DFSP)	- 乳腺癌 - 胃癌 - 肺癌 - 神经胶质瘤 - 软组织肉瘤：EWS、SS	- 乳腺癌 - 胃癌 - 肺癌 - 神经胶质瘤 - 卵巢癌 - 软组织肉瘤： EWS 、SS、DFSP

(责任编辑：佳学基因)